Preview

Исследования и практика в медицине

Расширенный поиск

Особенности экспрессии иммуногистохимических маркеров при локальном и генерализованном светлоклеточном раке почки

https://doi.org/10.17709/2409-2231-2020-7-1-2

Полный текст:

Аннотация

Цель исследования. Провести сравнительный анализ экспрессии следующих маркеров: Ki‑67, циклин D1, Е‑кадгерин, CD44, MMP‑9, VEGF, P53, виментин в опухолевой ткани почки при светлоклеточном раке в зависимости от распространенности опухолевого процесса.

Материалы и методы. Материалом для исследования послужил операционный материал 100 больных светлоклеточным раком почки, находившихся на лечении в ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» МЗ РФ с 2015 по 2018 г. У 50 пациентов диагностирован локальный рак (Т1–3 а N0 М0 ), у 50 – генерализованный (Т1–4N0 М1 ). Для иммуногистохимического (ИГХ) исследования материал фиксировали в 10% нейтральном формалине в течение 24 ч и заключали в парафин. Депарафинизацию и восстановление антигенной активности материала проводили в РТ-модуле (Thermo Fisher Scientific) с использованием Трис-буфера pH=9, в течение 20 мин при 98 °C. Постановку ИГХ-реакции проводили в иммуногистостейнере Autostainer 480S (Thermo Fisher Scientific). Применяли систему детекции UltraVision Quanto Detection System (Thermo Fisher Scientific), хромоген – DAB. Использованные антитела: E‑кадгерин (EP700Y) Cell Marque, 1:100; CD 44 (EPR1013Y) Cell Marque 1:150; Ki‑67 (SP6) Spring Bio, 1:200; P53 (DO‑7) Cell Marque, 1:200; циклин D1 (EP12) Dako, 1:200; VEGF Thermo Fisher, 1:100; Vimentin (V9) Dako, 1:150; MMP‑9 (EP100902) Epitomics, 1:100. Результаты реакций с маркерами оценивали, подсчитывая количество окрашенных клеток в каждом 3‑м поле зрения всего препарата при увеличении объектива ×200 в микроскопе AXIO Scope.A1 (Carl Zeiss). Полученные результаты выражали в процентах – доля окрашенных клеток по отношению ко всем клеткам опухоли в поле зрения. Для статистической обработки результатов использовали параметрические методы статистики. Достоверность разницы между двумя средними определяли по значению t‑критерия Стьюдента для несвязанных совокупностей.

Результаты. При светлоклеточном раке почки в целом отмечался невысокий уровень пролиферативной активности, однако при генерализованном, по сравнению с локальным (8±0,5% и 5±0,6% соответственно), он достоверно выше (Р<0,05) также при генерализованном раке наблюдалась гиперэкспрессия циклина D1–70±3,9%, против 14,4±2,3% при локальных стадиях, Р<0,05. При генерализованном раке почки по сравнению с локальным более выражены процессы эпителиально-мезенхимальной трансформации (достоверное усиление экспрессии виментина на 28% и CD44 на 16,6% (Р<0,05), снижение экспрессии Е‑кадгерина на 24% (Р<0,05), а также активация процессов неоангиогенеза (достоверное повышение уровня экспрессии VEGF на 32%, (Р<0,05)). Белок Р53 отсутствовал в клетках локального рака почки и был крайне низким при генерализованном – 3,8±0,7%. Один из основных маркеров деградации внеклеточного матрикса MMP‑9 был примерно на одинаковом уровне при обеих стадиях: при локальном – 50±6% и 49,6±7,2% при генерализованном, разница показателей недостоверна (Р<0,05).

Заключение. Прогрессия светлоклеточного рака почки от локальной формы к генерализованной сопровождается гиперэкспрессией циклина D1, снижением экспрессии Е-кадгерина при одновременном увеличении экспрессии виментина (нарастание признаков эпителиально-мезенхимальной трансформации), повышением экспрессии CD44 и VEGF.

Об авторах

Е. М. Франциянц
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия

Франциянц Елена Михайловна – д.б.н., профессор, заместитель генерального директора по науке, руководитель лаборатории «Изучение патогенеза злокачественных опухолей» 

SPIN: 9427-9928



А. Н. Шевченко
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия

Шевченко Алексей Николаевич – д.м.н., профессор, заведующий отделением онкоурологии 

SPIN: 2748-2638



Е. А. Дженкова
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия

Дженкова Елена Алексеевна – д.б.н., доцент, ученый секретарь 

SPIN: 6206-6222



Н. С. Карнаухов
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия

Карнаухов Николай Сергеевич – к.м.н., заведующий патологоанатомического отделения 

SPIN: 3100-0820



Т. Н. Гудцкова
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия
Гудцкова Татьяна Александровна – научный сотрудник патологоанатомического отделения


А. А. Бреус
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия

Бреус Анна Алекснадровна – соискатель 

Адрес: 344037, г. Ростов-на-Дону, ул. 14-я линия, д. 63



Е В. Филатова
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия

Филатова Елена Валерьевна – к.м.н., старший научный сотрудник отделения онкоурологии 

SPIN: 7517-1549



Д. А. Швырев
ФГБУ «Национальный медицинский исследовательский центр онкологии» Министерства здравоохранения Российской Федерации
Россия

Швырев Дмитрий Александрович – к.м.н., научный сотрудник отделения онкоурологии 

SPIN: 7496-4043



Список литературы

1. Ващенко Л.Н., Карнаухов Н.С., Гудцкова Т.Н., Кварчия М.В. Сопоставление уровня экспрессии маркеров пролиферации Ki 67 и циклина D1 в тройном негативном раке молочной железы с различным андрогеновым статусом. Современные проблемы науки и образования. 2018;(4):146.

2. Глушанкова Н.А., Житняк И.Ю., Рубцова С.Н. Роль эпителиально-мезенхимального перехода в опухолевой прогрессии. Биохимия. 2018; 83(12):1802–1811. https://doi.org/10.1134/ S0320972518120059

3. Basakran NS. CD44 as a potential diagnostic tumor marker. Saudi Med J. 2015 Mar; 36(3):273–279. https://doi. org/10.15537/smj.2015.3.9622

4. Pestell RG. New roles of cyclin D1. Am J Pathol. 2013 Jul; 183(1):3–9.

5. Кит О.И., Франциянц Е.М., Шевченко А.Н., Бреус А.А., Погорелова Ю.А., Нескубина И.В. Уровень некоторых факторов роста семейства VEGF при светлоклеточном раке почки. Известия высших учебных заведений северо-кавказский регион серия: естественные науки. 2018; 1(197):124–129.

6. Lin J, Ding D. The prognostic role of the cancer stem cell marker CD44 in ovarian cancer: a meta-analysis. Cancer Cell Int. 2017 Jan 5; 17:8. https://doi.org/10.1186/s12935–016–0376–4

7. Morath I, Hartmann TN, Orian-Rousseau V. CD44: More than a mere stem cell marker. Int J Biochem Cell Biol. 2016; 81(Pt A):166–173. https://doi.org/10.1016/j.biocel.2016.09.009

8. Basakran NS. CD44 as a potential diagnostic tumor marker. Saudi Med J. 2015 Mar; 36(3):273–9. https://doi. org/10.15537/smj.2015.3.9622

9. Morath I, Hartmann TN, Orian-Rousseau V. CD44: More than a mere stem cell marker. Int J Biochem Cell Biol. 2016; 81(Pt A):166–173. https://doi.org/10.1016/j.biocel.2016.09.009

10. Lin J, Ding D. The prognostic role of the cancer stem cell marker CD44 in ovarian cancer: a meta-analysis. Cancer Cell Int. 2017; 17:8. https://doi.org/10.1186/s12935–016–0376–4

11. Бреус А.А., Франциянц Е.М., Кит О.И., Шевченко А.Н., Нескубина И.В., Дженкова Е.А. и др. Половые различия в содержании компонентов инсулиноподобного сигнального пути в тканях почки при локальном и генерализованном светлоклеточном раке почки. Современные проблемы науки и образования. 2019;(5):81.

12. Нефедова Н.А., Давыдова С.Ю. Роль сосудистого эндотелиального фактора роста (VEGF) и гипоксия-индуцибельного фактора (HIF) в опухолевом ангиогенезе. Cовременные проблемы науки и образования. 2015;(3):51.

13. Гервальд В.Я., Сеченов Е.И., Черданцева Т.М., Бобров И.П., Климачев В.В., Авдалян А.М. и др. Экспрессия маркера пролиферации Ki 67 при раке почки: клинико-морфологические сопоставления. Сибирский онкологический журнал. 2012;(S1):43–44.

14. Li Z, Liu J, Zhang X, Fang L, Zhang C, Zhang Z, et al. Prognostic Significance of Cyclin D1 Expression in Renal Cell Carcinoma: a Systematic Review and Meta-analysis. Pathol Oncol Res. 2019 Nov 20. https://doi.org/10.1007/s12253–019–00776–0

15. Pestell RG. New roles of cyclin D1. Am J Pathol. 2013 Jul; 183(1):3–9. https://doi.org/10.1016/j.ajpath.2013.03.001

16. Morel A P, Hinkal GW, Thomas C, Fauvet F, Courtois-Cox S, Wierinckx A, et al. EMT inducers catalyze malignant transformation of mammary epithelial cells and drive tumorigenesis towards claudin-low tumors in transgenic mice. PLoS Genet. 2012; 8(5): e1002723. https://doi.org/10.1371/journal.pgen.1002723

17. Roy SS, Gonugunta VK, Bandyopadhyay A, Rao MK, Goodall GJ, Sun L Z, et al. Significance of PELP1/HDAC2/miR 200 regulatory network in EMT and metastasis of breast cancer. Oncogene. 2014 Jul 10; 33(28):3707–3716. https://doi.org/10.1038/onc.2013.332

18. Ващенко Л.Н., Карнаухов Н.С., Гудцкова Т.Н., Кварчия М.В. Сопоставление уровня экспрессии маркеров пролиферации Ki 67 и циклина D1 в тройном негативном раке молочной железы с различным андрогеновым статусом. Современные проблемы науки и образования. 2018;(4):146.

19. Кузнецов М.Б., Колобов А.В. Исследование влияния антиангиогенной монотерапии на прогрессию гетерогенной опухоли с помощью методов математического моделирования. Компьютерные исследования имоделирование. 2017; 9(3):487– 501. https://doi.org/10.20537/2076–7633–2017–9-3–487–501

20. Скворцов В.А., Манихас Г.М. Циклин D1 и его прогностическая значимость в планировании эндокринной терапии у женщин постменопаузального возраста при раке молочной железы. Врач-аспирант. 2012; 50(1.3):401–406.


Для цитирования:


Франциянц Е.М., Шевченко А.Н., Дженкова Е.А., Карнаухов Н.С., Гудцкова Т.Н., Бреус А.А., Филатова Е.В., Швырев Д.А. Особенности экспрессии иммуногистохимических маркеров при локальном и генерализованном светлоклеточном раке почки. Исследования и практика в медицине. 2020;7(1):16-24. https://doi.org/10.17709/2409-2231-2020-7-1-2

For citation:


Frantsiyants E.M., Shevchenko A.N., Dzhenkova E.A., Karnaukhov N.S., Gudtskova T.A., Breus A.A., Filatova E.V., Shvyrev D.A. Features of expression of immunohistochemical markers in local and generalized clear cell kidney cancer. Research and Practical Medicine Journal. 2020;7(1):16-24. (In Russ.) https://doi.org/10.17709/2409-2231-2020-7-1-2

Просмотров: 406


Creative Commons License
Контент доступен под лицензией Creative Commons Attribution 4.0 License.


ISSN 2409-2231 (Print)
ISSN 2410-1893 (Online)